VENTANA MMR RxDx Panel
Interpretačná príručka pre
endometriálny karcinóm
VENTANA anti-MLH1 (M1) Mouse Monoclonal Primary Antibody
VENTANA anti-PMS2 (A16-4) Mouse Monoclonal Primary Antibody
VENTANA anti-MSH2 (G219-1129) Mouse Monoclonal Primary Antibody
VENTANA anti-MSH6 (SP93) Rabbit Monoclonal Primary Antibody
Obsah
Úvod 1
Určené použitie 3
Určené použitie produktu 3
Účel interpretačnej príručky 3
Klinické hodnotenie 4
Charakteristiky farbenia 4
Kritériá prijateľnosti morfológie a pozadia 5
Prípadové kritériá na klinické hodnotenie 5
Skórovací algoritmus 6
Kontroly 8
Interné pozitívne kontroly 8
Pracovný postup týkajúci sa vzoriek 10
Referenčné obrázky 12
Proficientné prípady 12
Deficientné prípady 14
Problematické prípady 18
Vplyv predanalytických podmienok na panel VENTANA MMR RxDx Panel 28
Podmienky prijateľnej fixácie na dosiahnutie optimálnych výsledkov farbenia 28
Stabilita sklíčka s rezom 32
Hrúbka tkaniva 32
Literatúra 33
Oprava chybného párovania DNA (mismatch repair, MMR) je
konzervovaný molekulárny mechanizmus na opravu nesprávnych
substitúcií báz, ktoré sa spontánne vyskytujú počas replikácie
DNA. Na základe metód založených na polymerázovej reťazovej
reakcii (PCR) sa preukázalo, že zlyhanie MMR často vedie k
mikrosatelitovej nestabilite (MSI), čo je stav, pri ktorom sa do DNA
vkladajú krátke, tandemové repetície. Keď je počet repetícií
rovný alebo väčší ako 30 % vyšetrovaných mikrosatelitových
lokusov, MSI možno ďalej charakterizovať ako MSI vysokého
stupňa, resp. MSI-High (MSI-H). Defekty v MMR mechanizme sa
pripisujú mutáciám v MMR proteínoch, najčastejšie MLH1, PMS2,
MSH2 a MSH6.
Proteíny MLH1 a PMS2 zvyčajne fungujú spoločne v
heterodimérnom komplexe, rovnako ako proteíny MSH2 a
MSH6. Keď MMR funguje normálne, heterodimér MSH6/MSH2
sa viaže na nespárovanú DNA. Toto naviazanie indukuje zmenu
konformácie, vďaka ktorej sa môže heterodimér MLH1/PMS2
naviazať na komplex MSH6/MSH2 naviazaný na DNA, výsledkom
čoho je oprava postihnutej DNA excíziou. Výsledkom mutácií
alebo deficitov týchto proteínov je častá MSI a somatická
mutácia v dôsledku replikačnej chyby. Je možné preukázať, že
MMR imunohistochemické (IHC) testovanie môže byť užitočné
pri identifikovaní MMR génov, ktoré pravdepodobne obsahujú
zárodočné alebo somatické alterácie.
Tradične sa liečebné režimy u onkologických pacientov
určujú podľa konkrétnej malignity. Avšak nové imunoterapie,
najmä tie, ktoré modifikujú bunkové dráhy zahŕňajúce proteín
programovanej bunkovej smrti 1 (PD-1) alebo proteín ligandu
programovanej bunkovej smrti 1 (PD-L1), menia terapeutické
stratégie lekárov. PD-1 je inhibičný receptor exprimovaný na
T bunkách po aktivácii T buniek, ktorá je trvalá pri stavoch
chronickej stimulácie, ako je napr. chronická infekcia alebo
rakovina. Expresia PD-L1 sa zaznamenala v imunitných bunkách
a malígnych bunkách, pričom sa zaznamenalo, že aberantná
expresia PD-L1 na nádorových bunkách (TC) tlmí protinádorovú
imunitu, výsledkom čoho je imunitná evázia. Preto prerušenie
PD-L1/PD-1 dráhy predstavuje atraktívnu stratégiu na opätovné
posilnenie T-bunkovej imunity špecifickej pre nádor.
MMR proteíny (MLH1, PMS2, MSH2 a MSH6) sa všadeprítomne
exprimujú v proliferujúcich normálnych a malígnych bunkách.
Mnoho rakovín, ktoré sa často vyskytujú, je deficitných na MMR
(dMMR) a vykazujú MSI. Vo viacerých štúdiách sa preukázalo,
že deficit MMR koreluje s vyššou expresiou proteínov PD-1
alebo PD-L1. Takže MMR proteíny môžu byť užitočné ako
biomarkery pre PD-1 cielenú liečbu. Konkrétne strata expresie
jedného alebo viacerých MMR proteínov môže predpovedať
vyššiu pravdepodobnosť odpovede na takúto liečbu. Inhibítory
PD-1 môžu byť prospešné pri mnohých, často sa vyskytujúcich
rakovinách s vysokou frekvenciou deficitu MMR a/alebo MSI-H,
a to bez ohľadu na tkanivo, z ktorého rakovina vznikla. Preto
budú mať pacienti, ktorí zvažujú PD-1 cielenú liečbu, úžitok zo
sprievodného diagnostického testu na identifikáciu populácie
pacientov s deficitom MMR.
Endometriálny karcinóm (EC) je jedna z najčastejších
gynekologických malignít.
12
Často sa uvádza, že tento typ
karcinómu má mnoho genetických alterácií vrátane MSI.
12
Taktiež
sa predpokladá, že MSI EC môže mať vyššiu expresiu proteínu
PD-L1 v porovnaní s mikrosatelitne stabilným (MSS) EC.
16
Hoci sa
liečba EC líši v závislosti od stupňa, histológie a štádia ochorenia,
17
hodnotenie stavu MMR nádorov EC môže pomôcť pri prognóze
a vedení liečby
12
. Preto budú mať pacienti, ktorí zvažujú PD-1
cielenú liečbu, úžitok zo sprievodného diagnostického testu na
identifikáciu stavu MMR.
Strata expresie ktoréhokoľvek z MMR proteínov vrátane MLH1,
PMS2, MSH2 alebo MSH6 má za následok deficit MMR.
Prítomnosť sfarbenia pre všetky štyri markery proteínov MMR v
nádore označuje, že prípad je proficientný pre VENTANA MMR
IHC stav. Neprítomnosť sfarbenia v ktoromkoľvek z markerov MMR
proteínov vo VENTANA MMR RxDx Panel označuje, že prípad je
deficientný pre VENTANA MMR IHC stav.
Úvod
VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm 1
2 VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm
Určené použitie
Určené použitie produktu
Podrobné informácie o určenom použití tohto produktu vrátane
súvisiacich indikácií sú uvedené v príbalovom letáku príslušného
VENTANA MMR RxDx Panel.
Účel interpretačnej príručky
Táto príručka slúži na:
• Poskytnutie nástroja patológom na uľahčenie klinického
hodnotenia rezov nádorov fixovaných formalínom a zaliatych
do parafínu (FFPE), zafarbených panelom VENTANA MMR
RxDx Panel v súlade s navrhnutým označením produktu.
• Poskytnutie fotografií na znázornenie vzorov sfarbenia, ktoré
možno získať farbením vzoriek nádorov pomocou panela
VENTANA MMR RxDx Panel.
• Poskytnutie príkladov obrázkov problematických prípadov ako
pomôcka pri ich hodnotení.
• Poskytnutie usmernenia z hľadiska použitia prvkov
normálneho tkaniva pozitívneho na proteín MMR, ktoré slúžia
ako pozitívna interná kontrola pri farbení pomocou panela
VENTANA MMR RxDx Panel.
VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm 3
MMR intaktný a stratový stav farbenia: V týchto prípadoch endometriálneho karcinómu vykazujú jadrá jednoznačné sfarbenie,
ktoré je dominantným vzorom farbenia pozorovaným vo väčšine nádorových tkanív pri MSH6 intaktnom stave (ľavý panel).
Neprítomnosť žiadneho nukleárneho sfarbenia v nádorových tkanivách predstavuje MSH6 stratový stav (pravý panel). Jednoznačné
nukleárlne sfarbenie v interných kontrolných bunkách (t. j. lymfocytoch) v blízkosti životaschopných nádorov slúži ako akceptovateľná
interná pozitívna kontrola.
Charakteristiky farbenia
Klinické hodnotenie
Bunky označené s každým testom v paneli VENTANA MMR RxDx
Panel sa hodnotia z hľadiska prítomnosti alebo neprítomnosti
signálu diaminobenzidínu (DAB). Farbenie VENTANA MMR
RxDx Panel v MMR proteínoch vykazuje nukleárny vzor. Strata
ktoréhokoľvek z MMR proteínov detegovaných panelom
VENTANA MMR RxDx Panel sa zisťuje v jadrách nádorových
buniek. Stav MMR sa klasifikuje ako intaktný alebo stratový len na
základe jednoznačného nukleárneho sfarbenia.
• Intaktný stav je charakterizovaný nádorovými bunkami, ktoré
vykazujú jednoznačné sfarbenie, ktoré je rovnaké alebo väčšie
ako intenzita interných kontrol nad pozadím.
• Stratový stav je charakterizovaný neprítomnosťou
akéhokoľvek detegovateľného signálu. V prípadoch so stratou
sa môže stále zobrazovať svetlosivé nukleárne sfarbenie.
Signál môže byť distribuovaný homogénne s jednotnou
úrovňou intenzity v rámci celej neoplastickej časti nádora alebo
heterogénne s viac ako jednou úrovňou intenzity. Možno ho ľahko
identifikovať pri malom zväčšení (napr. 2x alebo 4x). Grafické
znázornenie typov neoplastických buniek/prvkov farbenia
označených panelom VENTANA MMR RxDx Panel je uvedené
v časti Referenčné obrázky tejto interpretačnej príručky.
Negatívna reagenčná kontrola (NRC) spárovaní podľa druhu
sa používa na hodnotenie prítomnosti pozadia v testovaných
vzorkách a stanovenie východiskovej intenzity farbenia. V tabuľke
č. 1 sú uvedené kritériá prijateľnosti morfológie a pozadia. V
tabuľke č. 2 sú uvedené prípadové kritériá na hodnotenie stavu
MMR neoplastického tkaniva s ktorýmkoľvek zo štyroch testov v
paneli VENTANA MMR RxDx Panel.
Neprítomnosť nukleárneho
sfarbenia v nádorových bunkách
Jednoznačné nukleárne sfarbenie
v nádorových bunkách
Intenzívne nukleárne
sfarbenie v lymfocytoch
4 VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm
MSH6 10x MSH6 10x
Kritériá prijateľnosti morfológie a pozadia
Pre každý prípad farbený panelom VENTANA MMR RxDx Panel sa hodnotí prijateľnosť morfológie a pozadia použitím kritérií opísaných v
tabuľke č. 1.
Prípadové kritériá na klinické hodnotenie
V tabuľke č. 2 sú zhrnuté kritériá na hodnotenie stavu MMR na sklíčku s neoplastickým tkanivom pomocou ktoréhokoľvek testu v paneli
VENTANA MMR RxDx Panel.
Kritériá Prijateľné Neprijateľné
Morfológia Bunkové prvky, ktoré sú predmetom záujmu,
sú vizualizované, čo umožňuje klinickú
interpretáciu špecifického farbenia
Bunkové prvky, ktoré sú predmetom záujmu, nie sú
vizualizované, čo obmedzuje klinickú interpretáciu
špecifického farbenia
Pozadie Pozadie neinterferuje s klinickou
interpretáciou špecifického farbenia
Pozadie interferuje s možnosťou interpretácie
špecifického farbenia
Tabuľka č. 1: Kritériá prijateľnosti morfológie a pozadia
Klinická interpretácia Kritéria vzoru sfarbenia
Hodnotiteľné (všetko musí byť pravda)
1. H&E má ≥ 50 životaschopných nádorových buniek
2. Sklíčko Negative Reagent Control je prijateľné
3. Morfológia je prijateľná
4. Pozadie je prijateľné
5. Interné pozitívne kontroly majú jednoznačné nukleárne sfarbenie
Nehodnotiteľné (ak je splnené jedno z
kritérií uvedených v tejto časti, farbenie na
sklíčku sa musí zopakovať alebo sa podľa
potreby prípad zamietne)
1. H&E má < 50 životaschopných nádorových buniek
2. Sklíčko Negative Reagent Control je neprijateľné
3. Morfológia je neprijateľná
4. Pozadie je neprijateľné
5. Interné pozitívne kontroly nemajú jednoznačné nukleárne sfarbenie
6. Interpretácia nie je možná kvôli strate tkaniva, absencii nádoru,
artefaktom a/alebo okrajovým artefaktom
Tabuľka č. 2: Hodnotiteľné a nehodnotiteľné kritériá
VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm 5
Panel VENTANA MMR RxDx Panel zahŕňa štyri testy: VENTANA
anti-MLH1 (M1) Mouse Monoclonal Primary Antibody,
VENTANA anti-PMS2 (A16-4) Mouse Monoclonal Primary
Antibody, VENTANA anti-MSH2 (G219-1129) Mouse Monoclonal
Primary Antibody a VENTANA anti-MSH6 (SP93) Rabbit
Monoclonal Primary Antibody. Na farbenie s každou z týchto
protilátok je potrebný sériový tkanivový rez testovanej vzorky.
Ďalšie sériové tkanivové rezy testovanej vzorky sú potrebné na
farbenie hematoxylínom a eozínom (H&E) a protilátkou NRC
zodpovedajúcou druhu príslušnej protilátky VENTANA MMR
RxDx Panel (Negative Control (Monoclonal) (mNRC) alebo Rabbit
Monoclonal Negative Control Ig (rNRC)).
Neoplastické bunky farbené panelom VENTANA MMR RxDx
Panel sa hodnotia z hľadiska prítomnosti alebo neprítomnosti
signálu diaminobenzidínu (DAB). Spárované sklíčko farbené s
NRC sa používa na posúdenie sfarbenia nešpecifického pozadia
a stupňa sfarbenia pozadia, o ktorom sa vie, že sa vyskytuje kvôli
špecifickým prvkom tkaniva (pozri obrázky proficientných a
deficientných prípadov).
Ak je na základe hodnotenia H&E vzorka pacienta nedostatočná
(napríklad ak je prítomných menej ako 50 životaschopných
nádorových buniek), potom sa má získať nová vzorka.
V prípade nesfarbených sklíčok sa má vykonať opakované
farbenie vzorky pre konkrétny test MMR RxDx v rámci panela
(napr. VENTANA anti-MLH1 (M1) Mouse Monoclonal Primary
Antibody), ak (1) prípadové sklíčko farbené s príslušnou NRC
pre daný test nevykazuje akceptovateľné sfarbenie alebo (2) ak
prípadové sklíčko farbené s daným konkrétnym testom MMR
RxDx (napr. VENTANA anti-MLH1 (M1) Mouse Monoclonal
Primary Antibody) nie je hodnotiteľné. Ak ktorékoľvek zo sklíčok
nemožno interpretovať kvôli nedostatočnému farbeniu v interných
pozitívnych kontrolných bunkách, prítomnosti artefaktov,
okrajových efektov, nekrózy, nedostatku tkaniva alebo iným
dôvodom, sklíčko nemožno hodnotiť. Ak je kontrolné farbenie
prijateľné a sklíčka farbené panelom VENTANA MMR RxDx Panel
sú hodnotiteľné, sklíčka môže vyhodnotiť skúsený patológ tak, ako
je opísané v časti „Skórovací algoritmus“.
POZNÁMKA: Súpravy OptiView DAB IHC Detection Kit a
OptiView Amplification Kit sú jediné detekčné reagencie, ktoré sa
odporúčajú na použitie s panelom VENTANA MMR RxDx Panel.
V tabuľkách č. 3 a 4 nižšie sú uvedené interpretácie pre expresiu
proteínov a MMR Status pre panel VENTANA MMR RxDx.
Reprezentatívne prípady sú prediskutované v časti Referenčné
obrázky.
Hodnotenie panela VENTANA MMR RxDx Panel:
Skórovací algoritmus
Tabuľka č. 4: Interpretácia stavu MMR s panelom VENTANA MMR RxDx Panel
Proficientný Deficientný
Všetky štyri proteíny (MLH1, PMS2, MSH2 a MSH6) v
paneli vykazujú intaktnú expresiu
Minimálne jeden proteín (MLH1, PMS2, MSH2 alebo MSH6) v
paneli vykazuje stratu expresie
Tabuľka č. 3: Interpretácia expresie proteínov s panelom VENTANA MMR RxDx Panel
Intaktná expresia proteínov Strata expresie proteínov
Jednoznačné nukleárne sfarbenie v životaschopných
nádorových bunkách v prítomnosti prijateľných
interných pozitívnych kontrol (napr. pozitívne farbenie v
lymfocytoch, fibroblastoch alebo v normálnom epiteli v
blízkosti nádoru)
Jednoznačná strata sfarbenia alebo ložiskové slabé jednoznačné
nukleárne sfarbenie v životaschopných nádorových bunkách v
prítomnosti prijateľných interných pozitívnych kontrol. Bodové
nukleárne sfarbenie sa považuje za negatívne
6 VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm
Klinická diagnostika proficientného endometriálneho karcinómu
MSH2 intaktný stav: Intenzívne
nukleárne sfarbenie v prítomnosti
prijateľných interných pozitívnych kontrol
PMS2 intaktný stav: Intenzívne nukleárne
sfarbenie v prítomnosti prijateľných
interných pozitívnych kontrol
MLH1 intaktný stav: Intenzívne nukleárne
sfarbenie v prítomnosti prijateľných
interných pozitívnych kontrol
Klinická diagnostika deficientného endometriálneho karcinómu
MLH1 stratový stav: Neprítomnosť
nukleárneho sfarbenia v prítomnosti
prijateľných interných pozitívnych kontrol
MSH6 stratový stav: Neprítomnosť
nukleárneho sfarbenia v prítomnosti
prijateľných interných pozitívnych kontrol
MSH2 stratový stav: Neprítomnosť
nukleárneho sfarbenia v prítomnosti
prijateľných interných pozitívnych kontrol
MLH1 20x MSH6 20x MSH2 20x
MSH2 20x
PMS2 20x
MLH1 20x
MSH2-
pozitívne
jadrá
PMS2-
pozitívne
jadrá
MLH1-
pozitívne
jadrá
VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm 7
Kontroly
Pri farbení s panelom VENTANA MMR RxDx Panel vykazujú
normálne prvky tkaniva (napr. lymfocyty, fibroblasty alebo
normálny epitel) v blízkosti nádoru nukleárne farbenie pre
MMR proteíny. Tieto tkanivové prvky slúžia ako interné pozitívne
kontroly a musia byť prijateľné na vyhodnotenie farbeného sklíčka
pre každý test v paneli. Interné kontroly musia byť hodnotiteľné
pre každý test a musia spĺňať kritériá farbenia pre interpretáciu
panela z hľadiska stavu MMR. V neprítomnosti jednoznačného
nukleárneho sfarbenia v lymfocytoch, fibroblastoch alebo
normálnom epiteli v blízkosti nádoru sa testované farbené sklíčko
bude považovať za „nehodnotiteľné“.
V tabuľke č. 5 sú opísané kritériá pre prijateľné interné kontrolné
sfarbenie.
Hodnotiteľné Nehodnotiteľné
Prítomnosť jednoznačného nukleárneho sfarbenia v prvkoch
normálneho tkaniva (napr. v lymfocytoch, fibroblastoch
alebo normálnom epiteli) v blízkosti nádoru
Neprítomnosť jednoznačného nukleárneho sfarbenia v prvkoch
normálneho tkaniva (napr. v lymfocytoch, fibroblastoch alebo
normálnom epiteli) v blízkosti nádoru
Tabuľka č. 5: Kritériá interného kontrolného sfarbenia
Interná pozitívna kontrola – prípad 1: Endometriálny karcinóm nevykazuje žiadne interné kontrolné sfarbenie v blízkosti nádorových
buniek, takže karcinóm nemožno hodnotiť. Znázornenou prijateľnou Negative Reagent Control je myšia NRC (mNRC).
Interné pozitívne kontroly
Nižšie sú uvedené reprezentatívne obrázky internej kontroly pre panel VENTANA MMR RxDx Panel.
8 VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm
H&E 40x mNRC 40x MLH1 40x
Interná pozitívna kontrola – prípad 2: V prípade MLH1 stratového stavu a v prípade MSH2 intaktného stavu je v blízkosti nádoru
endometriálneho karcinómu znázornené intenzívne interné kontrolné bunkové sfarbenie. Prijateľnou Negative Reagent Control je myšia
NRC (mNRC).
MLH1 20x
Interné kontrolné bunkové sfarbenie Interné kontrolné bunkové sfarbenie
VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm 9
H&E 20x mNRC 20x
MSH2 20x
Pracovný postup týkajúci sa vzoriek
Pri testovaní s panelom VENTANA MMR RxDx Panel sa vyžaduje
viacero sériových tkanivových rezov každej testovanej vzorky.
Na každé farbenie je potrebný jeden rez pre každý zo 4 testov:
VENTANA anti-MLH1 (M1) Mouse Monoclonal Primary
Antibody, VENTANA anti-PMS2 (A16-4) Mouse Monoclonal
Primary Antibody, VENTANA anti-MSH2 (G219-1129) Mouse
Monoclonal Primary Antibody a VENTANA anti-MSH6 (SP93)
Rabbit Monoclonal Primary Antibody. Okrem toho sú rezy každej
testovanej vzorky potrebné na farbenie s H&E a protilátkou NRC
zodpovedajúcou druhu príslušnej protilátky VENTANA MMR RxDx
Panel (mNRC alebo rNRC).
Ak je na základe hodnotenia H&E vzorka pacienta nedostatočná
(napríklad ak je prítomných menej ako 50 životaschopných
nádorových buniek), potom sa má získať nová vzorka. V prípade
nesfarbených sklíčok sa má vykonať opakované farbenie vzorky
pre konkrétny test MMR RxDx v rámci panela (napr. VENTANA
anti-MLH1 (M1) Mouse Monoclonal Primary Antibody), ak (1)
prípadové sklíčko farbené s príslušnou negatívnou reagenčnou
kontrolou nevykazuje akceptovateľné sfarbenie alebo (2) ak
prípadové sklíčko farbené s daným konkrétnym testom MMR
RxDx (napr. VENTANA anti-MLH1 (M1) Mouse Monoclonal
Primary Antibody) nie je hodnotiteľné. Ak ktorékoľvek zo sklíčok
nemožno interpretovať kvôli neprítomnému sfarbeniu v interných
pozitívnych kontrolných bunkách, artefaktom, okrajových
efektov, nekrózy, nedostatku tkaniva alebo iným dôvodom, sklíčko
nemožno hodnotiť. Ak sú kontroly prijateľné a sklíčka farbené
panelom VENTANA MMR RxDx Panel sú hodnotiteľné, sklíčka
môže vyhodnotiť skúsený patológ tak, ako je opísané v časti
„Skórovací algoritmus“.
POZNÁMKA: Súpravy OptiView DAB IHC Detection Kit a
OptiView Amplification Kit sú jediné detekčné reagencie, ktoré sa
odporúčajú na použitie s panelom VENTANA MMR RxDx Panel.
10 VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm
Postup týkajúci sa vzoriek
VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm 11
Rezy hrubé 4 m sa položia na
pozitívne nabité sklíčka. (potrebných
je 6 alebo 7 sériových rezov)
Zopakovanie farbenia s
novou vzorkou pacienta*
Nie Áno
Je H&E sklíčko
prijateľné (≥ 50
životaschopných
buniek)?
Jeden rez sa farbí s každým testom v paneli VENTANA MMR RxDx Panel. Okrem
toho sa každá podmienka testu farbí pomocou druhovo párovanej negatívnej
reagenčnej kontroly, Negative Control (Monoclonal) (mNRC) alebo Rabbit
Monoclonal Negative Control Ig (rNRC) podľa potreby v tom istom chode
prístroja.
Výsledok MMR (MLH1, PMS2, MSH2, MSH6) stanovuje
skúsený patológ podľa Algoritmu Hodnotenia panela
VENTANA MMR RxDx Panel.
Nie
Nie
Nie
Áno
Áno
Áno
Je farbené sklíčko
vzorky s negatívnou
reagenčnou
kontrolou
prijateľné?
Vykazuje každé
farbené sklíčko
vzorky prijateľné
interné kontroly?
Sú sklíčka vzoriek
farbených panelom
VENTANA MMR
RxDx Panel
prijateľné?
Nádorový H&E
Nádorová NRC
*Farbenie možno podľa potreby zopakovať na tom istom
bloku tkaniva pacienta alebo na inom bloku tkaniva toho
istého pacienta.
(Všetky obrázky nádorov pri 20x zväčšení)
Interná kontrola
Nádorová IHC
Vzorka nádorového tkaniva sa 6 –
72 hodín fixuje v 10 % neutrálnom
pufrovanom formalíne.
Jeden rez sa zafarbí s H&E.
Zopakovanie cyklu
farbenia
Zopakovanie farbenia
prípadu*
Zopakovanie farbenia
prípadu*
12 VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm
Referenčné obrázky
Proficientný prípad 1: MLH1, PMS2, MSH2 a MSH6 intaktný stav pri endometriálnom karcinóme vykazujúcom intenzívne
nukleárne sfarbenie v nádorových bunkách v prítomnosti náležite sfarbených interných kontrol. Znázornenými prijateľnými Negative
Reagent Controls sú myšia NRC (mNRC) a králičia NRC (rNRC).
Proficientné prípady
mNRC 20x
rNRC 20x
MLH1 20x PMS2 20x
MSH2 20x MSH6 20x
H&E 20x
VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm 13
Proficientný prípad 2: MLH1, PMS2, MSH2 a MSH6 intaktný stav pri endometriálnom karcinóme vykazujúcom intenzívne
nukleárne sfarbenie v nádorových bunkách v prítomnosti náležite sfarbených interných kontrol. Prijateľnými Negative Reagent Controls
sú myšia NRC (mNRC) a králičia NRC (rNRC).
H&E 20x
mNRC 20x rNRC 20x
MLH1 20x PMS2 20x
MSH2 20x MSH6 20x
14 VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm
Deficientný prípad 1: MLH1 a PMS2 stratový stav pri endometriálnom karcinóme bez nukleárneho sfarbenia v nádorových
bunkách v prítomnosti náležite sfarbených interných kontrol. MSH2 a MSH6 vykazujú intaktný stav. Cytoplazmatické zafarbenie sa
pri interpretácii stavu neberie do úvahy. Prijateľnými Negative Reagent Controls sú myšia NRC (mNRC) a králičia NRC (rNRC).
Deficientné prípady
H&E 20x
mNRC 20x rNRC 20x
MLH1 20x PMS2 20x
MSH2 20x MSH6 20x
VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm 15
Deficientný prípad 2: MLH1 a PMS2 stratový stav pri endometriálnom karcinóme bez nukleárneho sfarbenia v nádorových
bunkách v prítomnosti náležite sfarbených interných kontrol. MSH2 a MSH6 vykazujú intaktný stav. Cytoplazmatické zafarbenie sa pri
interpretácii stavu neberie do úvahy. Prijateľnými Negative Reagent Controls sú myšia NRC (mNRC) a králičia NRC (rNRC).
H&E 20x
mNRC 20x rNRC 20x
MLH1 20x PMS2 20x
MSH2 20x MSH6 20x
16 VENTANA MMR RxDx Panel pre endometriálny karcinóm
Deficientný prípad 3: MSH2 a MSH6 stratový stav pri endometriálnom karcinóme bez nukleárneho sfarbenia v nádorových
bunkách v prítomnosti náležite sfarbených interných kontrol. MLH1 a PMS2 vykazujú intaktný stav. Cytoplazmatické zafarbenie sa pri
interpretácii stavu neberie do úvahy. Prijateľnými Negative Reagent Controls sú myšia NRC (mNRC) a králičia NRC (rNRC).
H&E 20x
mNRC 20x rNRC 20x
MLH1 20x PMS2 20x
MSH2 20x MSH6 20x
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
Stránka sa načítava ...
-
1
-
2
-
3
-
4
-
5
-
6
-
7
-
8
-
9
-
10
-
11
-
12
-
13
-
14
-
15
-
16
-
17
-
18
-
19
-
20
-
21
-
22
-
23
-
24
-
25
-
26
-
27
-
28
-
29
-
30
-
31
-
32
-
33
-
34
-
35
-
36
-
37
-
38
Roche BenchMark ULTRA Interpretation Guide
- Typ
- Interpretation Guide
- Táto príručka je tiež vhodná pre
Súvisiace články
-
Roche BenchMark XT/LT Interpretation Guide
-
Roche Virtuoso Používateľská príručka
-
-
-
-
-
-
-
Roche uPath IVD Používateľská príručka
